Reichert 4SPR/2SPR

一、公司简介

Reichert总部位于美国布法罗市,是一家极其卓绝并极具创新性的高科技企业。具有170余年研 发、设计及生产高级

光学仪器及分析仪器的历史与经验,并在过去20年里给全球生命科学和药物 研发等领域用户提供最为灵敏和稳健的

表面等离子体(Surface Plasmon Resonance, SPR)仪 器。仅在过去10年,采用Reichert公司SPR技术发表的高质

量文献多达数百篇。Reichert生命科 学业务部将继续研发并生产最灵敏准确、性价比最高的SPR系统,使全球研究

者可以探索并超越 分子间相互作用非标记检测的极限。

Reichert总部位于美国纽约州布法罗市

获取数据信息

图1.Reichert SPR技术获取数据信息

应用领域
  • 浓度测定:可测定生物活性分子(蛋白、抗体、细胞因子、生物标志物等)及(小分子化合物、农药残留、毒素等)准确浓度
  • 是否结合(Yes/No):可快速判断分子间是否存在结合
  • 亲和力测定(KD):可准确测定分子间从mM到pM范围亲和力
  • 动力学测定(KD, Ka, Kd) :通过实时动力学方式提供分子间结合快慢信息,除了提供亲和力信息外,还可呈现结合常数和解离常数
  • 热动力学分析( △H,△S):热动力学分析可提供分子间结合深层次机理,判断焓驱动或熵驱动结合,有助于药物创新设计
应用类型
  • 蛋白-蛋白/核酸/糖/脂/小分子相互作用
  • 完整细胞-分子相互作用
  • 抗体-抗原相互作用
  • 抗体筛选,表位筛选
  • 疫苗、纳米材料、聚合物
  • 脂质体(Liposome)、外泌体(exosomes)、病毒、病毒样颗粒(VLPs)
  • 热动力学分析 (△H & △S)
  • 活性浓度分析
样品类型
  • 常规样品:如蛋白、核酸、小分子、细胞上清、细胞裂解液上清等
  • 完整细胞:可研究蛋白与完整原核及真核细胞、以及膜性成分(包括细胞膜)之间相互作用
  • 血液:直接检测血液样品,减少处理步骤,排除纯化过程对样品的影响
  • 细胞裂解液、噬菌体、胶体金颗粒、纳米材料等

应用案例

图2. 大分子相互作用(HSA与anti-HSA相互                                           图3. 小分子相互作用(CAII与95Da小分
作用)                                                                                            子Methanesulfonamide相互作用)
kon=1.77×105M-1s-1,koff=1.17×10-3s-1,                                      kon = 3.92 ×102 M-1s-1
KD=6.62nM                                                                                    koff = 2.56×10-1 s-1,KD = 652 μM


图4. SPR-荧光显微镜联用(HEK细胞与纤维                                             图5. DNA( T-bulge)与锌指复合物相互作用
原蛋白相互作用)                                                                               kon=4.68×103M-1s-1
kon1 = 2.4 ×103 M-1s-1,koff1 = 8.5×10-3 s-1,                                koff=1.7×10-1s-1
KD1 = 3.54 μM;kon2 = 9.7×103  M-1s-1,                                        KD=36.4μM
koff2 = 2.5×10-4 s-1,KD2 = 26.4 nM

图6. 植物蛋白相互作用(植物蛋白TWD1                                      图7. 酶抑制剂的热动力学研究(4-CBS与

与生长素转运抑制剂NPA相互作用)                                             CAII在20℃(蓝线)及35℃(红线)结合

KD=105μM                                                                                  的温度依赖信号曲线,ΔH为-6.0kcal/mol 。

图8. 纳米颗粒相互作用(纳米金颗粒修                                           图9. 纳米颗粒相互作用(AP1修饰的

饰的多肽与其抗体相互作用)                                                        纳米笼状颗粒与IL-4的相互作用)

kon=6.9×106M-1s-1 kon=5.25×105M-1s-1 koff=1.55×10-4s-1

KD=0.30nM

图10. SPR-电化学联用(电压对生物素标                                                    图11. 化学溶液研究(CaCl2溶液对羧甲基

记的短肽与链霉亲和素相互作用的影响)                                                    纤维素吸附的影响)


图12A. 细菌相互作用(通过细菌特异                                                      图12B. 细菌相互作用(分析菌落生长数)

性抗体捕获细菌)


直观易用的软件

  • 数据分析处理:动力学分析曲线拟合至少5种模型可选:1:1model,1:2model,2:1model, mass transport model,2-state model等
  • 数据分析可采用结合速率或结合信号,实验数据也可直接导入其他专业数据分析软件如Scrubber,Clamp,TraceDrawer等,分析结果支持多种输出格式,Excel,JEPG等
  • 数据采集和显示:数据采集软件可用于实验方法创建、保存和运行,并能自动化控制检测模块、进样器、注射泵等,可自行计算非常规溶剂或现行缓冲液的温度系数,精确控制样品仓温度和样品检测温度,实现长时间无人值守自动化检测,按照实验要求完成热动力学检测等,检测过程中实时显示所有步骤曲线
  • 支持监管法规环境,符合GxP和21 CFR Part 11
种类丰富的各种芯片
  • 传感器芯片:≥12种,包括裸金芯片、固定生物素化ligand芯片、固定脂质体的芯片、捕获细胞的芯片、特殊的捕获芯片以及客户自定义芯片
  • 具有捕获标记生物素的SA芯片和对应试剂盒
  • 捕获带His标签蛋白的NTA芯片
  • 具有捕获细胞的芯片
灵敏度高,数据可靠
ReichertSPR可为药物研究、药物发现、抗体筛选、蛋白结构/功能、基因调控及系统生物学研究等提供至关重要的定量信息,可提供如下高质量、高可信度数据:
  • 严谨的动力学分析,结合速率/解离速率-影响治疗性候选分子适用性及剂量的生物学学位重要指标。
  • 亲和力范围从极弱到极强(1mM到1pM)。使得研究最细微和最强效生物学通路以及更多疗法选择成为可能。
  • 极低的噪音和基线漂移,噪音水平0.05μRIU(RMS),基线漂移0.1μRIU/分钟。

可选择升级特殊流路,拓展应用
  • 默认配置标准流路,可满足从小分子到细胞在内的大多数应用
  • 采用Reichert SPR具有的特殊流路拓展应用能力:电化学流路、石英窗流路(可引入第二光源),在检测SPR数据的同时研究兴趣分子光化学变化或荧光属性(兼容光学显微镜)、质谱流路(用于鉴定结合到芯片表面的分子)。
独特应用
  • 电化学流路:流路中兴趣分子可引发芯片表面的电化学变化,记录SPR信号数据的同时进行SPR/电流分析、SPR/脉冲伏安法、SPR/循环伏安法,并可检测聚合物的形成和其他新的应用
  • 光化学/荧光流路:引入第二光源,在检测SPR数据的同时研究兴趣分子光化学变化或荧光属性(兼容荧光显微镜)

  • 质谱流路(SPR-MS):用于鉴定结合到芯片表面的兴趣分子





利用Reichert发表的相关文章

Reichert SPR分子相互作用仪是利用经典SPR原理获得得到分子相互作用过程中量化数据的设备。该设备可检测的样品既包括了经典的抗体-抗原,也包括了核酸、糖类和螯合物等分子类型。近期有多篇利用Reichert SPR设备得到实验结果的高质量文献发表。


1、2018年,Ekaterina V. Filippova等利用Reichert 4SPR在mBio上发表题为Structural Basis for DNA Recognition by the Two-Component Response Regulator RcsB的文章,文中结构分析结果与体外结合分析的结果相结合,为蛋白质调控机制提供了有价值的见解,证明了RcsB如何识别目标DNA序列,并揭示了一种独特的寡聚状态,使RcsB能够形成同源和异源二聚体。这些信息将帮助我们了解RcsB在细菌中转录调控的复杂机制。RcsB-DNA复杂结构为RcsB的转录调节机制的结构基础提供了深入的见解,并为抗革兰氏阴性病菌的新型抗菌化合物的设计提供了一个平台。


2、2018年,Raluca Ștefănescu等利用Reichert‐Ametek 2Ch‐7500(即现在的Reichert 2SPR)在Journal of Peptide Science上发表题为Molecular characterization of the β‐amyloid(4‐10) epitope of plaque specific Aβ antibodies by affinity‐mass spectrometry using alanine site mutation的文章,文中报道了为确定与抗体结合的氨基酸残基的功能意义,Aβ-表位序列中丙氨酸单碱基突变对抗原-抗体相互作用的产生影响。这些结果在阐明结合机制和提高疗效的Aβ-特异性抗体发展方面提供了有价值的信息。作者鉴定了单克隆抗体和多克隆抗体对β-淀粉质斑块特异性抗原表位的识别至关重要的氨基酸残基,这表明抗体在阿尔茨海默病(AD)治疗方法发展中的特殊价值。


3、2018年Samantha J. Katner等利用Reichert SR7500DC (即现在的Reichert 2SPR)在Inorganic Chemistry 上发表题为Comparison of Metal−Ammine Compounds Binding to DNA and Heparin. Glycans as Ligands in Bioinorganic Chemistry的文章,文中结果扩展了我们对生理相关水合金属阳离子与肝素配位化合物相互作用定义的理解。


4、2018年,Anna Kidakova等利用Reichert SR7500DC(即现在的Reichert 2SPR) 在Reactive and Functional Polymers上发表题为Preparation of a surface-grafted protein-selective polymer film by combined use of controlled/living radical photopolymerization and microcontact imprinting的文章,文中提出的简单的合成策略为基于分子印迹的传感系统的发展提供了一种前瞻性的解决方案,可用于临床检测与多种疾病相关蛋白质,如肾脏疾病、癌症等。


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